【研究意義】金鉆蔓綠絨(Philodendron con-go)又名金鉆原產(chǎn)南美洲，為熱帶和亞熱帶常見觀賞植物。屬多年生常綠草本陰生植物，觀賞期長栽培容易生命力非常強，又具有凈化空氣的作用，在我國各地獲得廣泛栽培。目前新疆金鉆蔓綠絨種苗一直是靠外地調(diào)運，其種苗質(zhì)量參差不齊價格不穩(wěn)定，葉片大遠途運輸易造成傷痕降低種苗的商品性。金鉆蔓綠絨種苗生產(chǎn)在新疆進行規(guī)?；a(chǎn)，既能解決當(dāng)前面臨的問題，又能不斷地推動新疆種苗生產(chǎn)的技術(shù)提升，保證市場的有序發(fā)展。【前人研究進展】目前國內(nèi)對金鉆蔓綠絨的種苗組培研究較少，結(jié)論也不盡相同，報道不定芽適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L，增殖培養(yǎng)基為MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA較好。這些方法都是先通過誘導(dǎo)愈傷，再由愈傷誘導(dǎo)不定芽來建立快繁體系的，用這種方法建立快繁體系較慢，而且組培苗生長及質(zhì)量也會受到一定的影響，從而對組培苗的快繁生產(chǎn)也就不會很理想。【本研究切入點】研究很佳外植體取材部位，直接誘導(dǎo)不定芽，快速建立快繁體系;并根據(jù)金鉆蔓綠絨氣生根發(fā)達的生物特性，研究簡化培養(yǎng)程序的方法?！緮M解決的關(guān)鍵問題】研究建立金鉆蔓綠絨快繁體系及簡化培養(yǎng)程序的方法，為金鉆蔓綠絨組培苗工廠化生產(chǎn)提供可靠的技術(shù)支撐。

  1 材料與方法

  1.1 材 料

  在新疆沃爾曼種業(yè)科技有限責(zé)任公司溫室內(nèi)金鉆蔓綠絨植株上，取一年生無病蟲害的健壯的莖段、葉柄作為外植體。

  1.2 方 法

  1.2.1 金鉆蔓綠絨外植體消毒

  采回來的外植體，剪取莖段和葉柄，將氣生根處理干凈，放到洗潔精水中用小刷子刷洗干凈，放在流動的自來水中沖洗1 h。再進行滅菌處理，用75%的酒精和0.1%的升汞按1∶3的比例混合對外植體進行消毒，消毒時間設(shè)5、7、10min三個處理，各接5瓶，每瓶接4個外植體，接種在MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每天光照12 h，光照強度為1 600～2 000 lx，培養(yǎng)溫度25～30℃，接種15 d后進行污染率統(tǒng)計。

  1.2.2 誘導(dǎo)萌發(fā)金鉆蔓綠絨外植體

  不同部位的外植體，接種于MS+NAA0.1 mg/L添加不同水平BA(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L)的培養(yǎng)基中，各接10瓶，每瓶接1個外植體。每天光照12 h，光照強度為1 600～2 000 lx,培養(yǎng)溫度25～30℃，接種30 d后統(tǒng)計誘導(dǎo)率。

  1.2.3 金鉆蔓綠絨增殖培養(yǎng)基

  誘導(dǎo)出的無菌苗，接種于MS+NAA0.1 mg/L添加不同水平BA(0、0.1、0.3、0.5、1.0 mg/L)的培養(yǎng)基中，各接5瓶，每瓶接1株(叢)。每天光照12 h，光照強度為3 000～5 000 lx，培養(yǎng)溫度24～28℃，接種30 d后統(tǒng)計增殖率。

  1.2.4 金鉆蔓綠絨移栽基質(zhì)

  當(dāng)增殖培養(yǎng)的瓶苗長到1.5～2 cm時，把1.5 cm及以上的帶氣生根的苗子切下來，然后用水洗凈根部的培養(yǎng)基，移栽到裝有不同基質(zhì)(草炭、草炭與珍珠巖6∶1混合、蛭石、珍珠巖)的穴盤中，每種處理100株。前期置于空氣濕度80%以上，溫度控制在27～30℃。后期濕度可降低到60%左右，每3～4 d噴施一次多菌靈1 000倍液(50%可濕性粉劑)。待馴化20～25 d后逐漸撤去薄膜，進行種苗正常管理并統(tǒng)計成活率。

  2 結(jié)果與分析

  2.1 金鉆蔓綠絨外植體的滅菌效果

  研究表明，外植體的不定芽誘導(dǎo)15 d后，不同滅菌時間對不同部位的滅菌效果有一定的差異，葉柄滅菌7 min與滅菌10 min比較差異非常顯著，與滅菌5 min比較差異顯著，葉柄滅菌7 min，污染率為25%;而莖段滅菌時間7與5 min比較差異非常顯著，與滅菌10 min比較差異顯著，莖段滅菌7 min，污染率僅為35%，所以葉柄、莖段滅菌時間以7 min為宜。表1

  表1 不同消毒時間對不同部位外植體的滅菌效果

  注：同一列中不同字母表示LSD測驗下在P<0.05水平下差異顯著，下同

  2.2 不同激素濃度配比對不同部位外植體誘導(dǎo)不定芽的影響

  研究表明，將不同部位的外植體，接種于含有不同激素濃度MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)30 d后，誘導(dǎo)出的總芽數(shù)及不定芽的誘導(dǎo)率是不同的。添加不同濃度的BA對不同部位的外植體誘導(dǎo)不定芽有明顯的差異。葉柄只能誘導(dǎo)出愈傷組織，而不能直接誘導(dǎo)出不定芽;而莖段可直接誘導(dǎo)出不定芽。添加BA2.0 mg/L時，與BA0.5 mg/L時差異非常顯著。但在實際工作中，誘導(dǎo)率太高會影響下一步的增殖培養(yǎng)時組培苗的質(zhì)量，因而以添加6-BA1.5 mg/L的激素濃度較為適宜。表2

  表2 不同激素梯度配比對不同部位外植體誘導(dǎo)不定芽的效果

  2.3 不同激素濃度梯度對不定芽增殖的影響

  研究表明，將誘導(dǎo)出的不定芽叢，接種于附加有不同激素濃度梯度的培養(yǎng)基中，添加不同濃度的BA對不定芽增殖有明顯的差異。當(dāng)添加BA1.0與0.5 mg/L時，不定芽的增殖率分別為4.58%與4.25%，兩者平均為4.12%，但均會產(chǎn)生玻璃苗。BA0.1與0.3 mg/L時，不定芽的增殖率分別為3.58%與3.92%，兩者平均為3.75%，均無玻璃苗產(chǎn)生。在生產(chǎn)中玻璃苗會影響到增殖培養(yǎng)時組培苗的質(zhì)量，從產(chǎn)生玻璃苗和不產(chǎn)生玻璃苗添加的BA含量的產(chǎn)生不定芽相比，僅高12.6%誘導(dǎo)不定芽率。因而增殖培養(yǎng)以添加BA0.1～0.3 mg/L的激素濃度較為適宜。表3

  表3 不同激素濃度配比下不定芽增殖的變化

  2.4 不同基質(zhì)對試管苗移栽成活率的影響

  研究表明，在蛭石中試管移栽苗綠生長正常成活率為81%，但易爛根。在珍珠巖中能正常生長，但苗黃且生長速度較慢移栽成活率為87%。在草炭土中試管苗移栽成活率為90%。在草炭土+珍珠巖中試管苗移栽苗生長速度快成活率為98%，比純草炭土移栽成活率高8.8%。表4

  表4 不同基質(zhì)下試管苗移栽成活率

  3 討 論

  3.1 在選擇外植體誘導(dǎo)時，取植株的什么部位進行誘導(dǎo)是誘導(dǎo)快慢、成否的決定因素之一，通過對金鉆蔓綠絨不同部位的外植體誘導(dǎo)試驗，發(fā)現(xiàn)添加不同濃度的BA對不同部位的外植體誘導(dǎo)不定芽有明顯的差異。用葉柄只能誘導(dǎo)出愈傷組織，而不能直接誘導(dǎo)出不定芽;而莖段可直接誘導(dǎo)出不定芽。當(dāng)添BA2.0 mg/L時，芽的誘導(dǎo)率為550%，但在實際工作中，誘導(dǎo)激素太高，激素的富集作用會影響下一代增殖培養(yǎng)時瓶苗的質(zhì)量，會產(chǎn)生不同程度的玻璃苗，因而誘導(dǎo)不定芽的激素不宜太高，以添加BA1.5 mg/L的激素濃度較為適宜。

  3.2 在增殖培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中添加的BA水平不同，芽的增殖率與長勢存在顯著差異。增殖率與BA濃度密切相關(guān)，在試驗濃度范圍內(nèi)，增殖率隨BA濃度的升高呈升高趨勢。添加不同濃度的BA對不定芽增殖有明顯的差異。當(dāng)添加BA1.0 mg/L時，不定芽的增殖率為4.58%，但同時會產(chǎn)生大量的玻璃苗，而在生產(chǎn)中，玻璃苗的出現(xiàn)，會嚴(yán)重影響到增殖培養(yǎng)時增殖率及組培苗的成苗質(zhì)量，因而增殖培養(yǎng)以添加BA0.1～0.3 mg/L的激素濃度較為適宜。

  3.3 根據(jù)金鉆蔓綠絨氣生根發(fā)達的生物特性，在增殖過程中，可直接把1.5 cm以上的帶氣生根的小植株剪切下來進行移栽，簡化了生根程序。研究將帶有氣生根的植株直接移栽到草炭與珍珠巖6∶1混合的穴盤中，其成活率為98%，待苗生長到10 cm左右時就可以進行移栽上盆。該簡化生根移栽方法，操作簡單，有效地提高了金鉆蔓綠絨組培苗成苗生產(chǎn)的速度。

  4 結(jié) 論

  以金鉆蔓綠絨一年生莖段為試材，篩選其誘導(dǎo)、增殖的很佳培養(yǎng)基，簡化生根、移栽方法，快速組培生產(chǎn)好的種苗為研究對象。金鉆蔓綠絨的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L，增殖培養(yǎng)基為MS+BA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L，氣生根苗在煉苗成活率達98%，草炭和珍珠巖混合基質(zhì)很適于移栽。通過對金鉆蔓綠絨的組培繁殖生產(chǎn)技術(shù)研究，建立金鉆蔓綠絨的組培快繁體系，為金鉆蔓綠絨好的種苗工廠化生產(chǎn)提供可靠的技術(shù)支撐。