捕蠅草又名蒼蠅夾,是食蟲(chóng)植物茅膏菜科內(nèi)的捕蠅草屬,為多年生草本。植株秀麗別致,它能散發(fā)出對(duì)昆蟲(chóng)有誘惑性的芳香,可引誘昆蟲(chóng)前來(lái)并捕抓,而后由葉面的紫紅色腺體分泌消化液將昆蟲(chóng)分解并吸收,是一種很有趣的小型食蟲(chóng)植物。在歐美常用來(lái)盆栽觀賞。由于捕蠅草有一對(duì)可開(kāi)合的捕蟲(chóng)葉片,具有十分明顯的捕蟲(chóng)特征,且葉色鮮紅,是優(yōu)良的珍奇觀賞花卉及學(xué)校生物課的植物活教材,因此十分受歡迎被廣泛栽培,目前美國(guó)、荷蘭等國(guó)均已產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)供應(yīng)市場(chǎng)。
捕蠅草常規(guī)用葉片扦插,子芽分植等無(wú)性方法繁殖。由于葉片扦插成活率低,植株萌芽能力較差,滿足不了市場(chǎng)的需求,而應(yīng)用組培技術(shù)可以較快獲得大量的幼苗。目前,國(guó)內(nèi)有關(guān)捕蠅草組織培養(yǎng)研究報(bào)道較少,本文通過(guò)試驗(yàn)實(shí)踐,總結(jié)出了一套捕蠅草的實(shí)用組培快繁技術(shù),并在企業(yè)形成規(guī)?;a(chǎn),品質(zhì)良好,產(chǎn)品出口到荷蘭,取得較好的經(jīng)濟(jì)效益。
1 試驗(yàn)材料和方法
取荷蘭來(lái)捕蠅草的種子,用自來(lái)水清洗干凈,后用70%的酒精浸潤(rùn)約0.5 min,無(wú)菌水沖洗2~3次。用0.1%升汞消毒0.5~1 min,無(wú)菌水沖洗3~5次,濾干水后接種至MS+6-BA 0.1 mg/L的培養(yǎng)基中。約30天后出現(xiàn)愈傷組織,將愈傷組織接種至1/2MS的培養(yǎng)基中,經(jīng)30天后出現(xiàn)叢狀小芽,叢狀小芽分切成2~3個(gè)芽/團(tuán)繼代培養(yǎng)。
以上培養(yǎng)基均含蔗糖3%,卡拉膠0.75%,pH值5.5,培養(yǎng)溫度22~24℃,光照10~12 h/天,光強(qiáng)1 500~2 000 lx。
2 結(jié)果與分析
2.1 愈傷組織的誘導(dǎo)
將備好的種子5個(gè)一團(tuán)為1個(gè)增殖單位接種到誘導(dǎo)愈傷試驗(yàn)培養(yǎng)基中。共4個(gè)處理。基本培養(yǎng)基為MS,每升分別添加細(xì)胞分裂素2IP 0.3 mg、6-KT 0.3 mg、6-BA 0.1 mg、6-BA 0.3 mg。根據(jù)觀察,試驗(yàn)結(jié)果如下:捕蠅草種子對(duì)三種細(xì)胞分裂素均敏感,但KT和2ip形成愈傷比率稍低,且KT有少量玻璃化現(xiàn)象。而6-BA又以0.1 mg/L為好,所形成愈傷比例較高且無(wú)玻璃化現(xiàn)象,質(zhì)量好。含6-BA 0.3 mg/L的培養(yǎng)基雖形成愈傷比率高,但其愈傷呈現(xiàn)很高比例的玻璃化,質(zhì)量不好。因此,愈傷組織誘導(dǎo)以MS添加細(xì)胞分裂素6-BA 0.1 mg/L培養(yǎng)基好。
2.2 芽的誘導(dǎo)
把愈傷組織分成約0.3 cm大小的塊狀,分別接入以下誘導(dǎo)芽的試驗(yàn)培養(yǎng)基中,共9個(gè)處理。三個(gè)處理基本培養(yǎng)基為MS,每升分別添加細(xì)胞分裂素0、2IP 0.05 mg、6-KT 0.05 mg。三個(gè)處理基本培養(yǎng)基為1/2MS,添加細(xì)胞分裂素同上。另三個(gè)處理基本培養(yǎng)基為1/8MS,添加細(xì)胞分裂素也同上。根據(jù)觀察,試驗(yàn)結(jié)果如下:以MS為基本培養(yǎng)基的愈傷組織都有玻璃化現(xiàn)象,添加了細(xì)胞分裂素的更嚴(yán)重。以1/8MS為基本培養(yǎng)基的愈傷組織都有死亡現(xiàn)象,添加了細(xì)胞分裂素的還有玻璃化現(xiàn)象。以1/2MS為基本培養(yǎng)基未添加細(xì)胞分裂素的愈傷組織正常,誘導(dǎo)的小芽多且生長(zhǎng)好,植株挺拔。但添加了細(xì)胞分裂素的有玻璃化現(xiàn)象。綜上分析,愈傷誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)1/2MS基本培養(yǎng)基優(yōu)于MS和1/8MS兩種基本培養(yǎng)基,又以1/2MS基本培養(yǎng)基且不添加任何細(xì)胞分裂素為很佳。
2.3 芽的增殖
將誘導(dǎo)出的小芽叢分成2~3個(gè)芽/團(tuán),轉(zhuǎn)入各增殖試驗(yàn)培養(yǎng)基中,共8個(gè)處理。基本培養(yǎng)基四個(gè)處理為1/2MS,另四個(gè)處理為1/8MS。每升分別添加細(xì)胞分裂素2IP 0.01 mg、2IP 0.03 mg、6-KT 0.01 mg、6-BA 0.01 mg和生長(zhǎng)素IAA 0.01 mg.以40天為一個(gè)周期續(xù)代一次可產(chǎn)生3~5個(gè)子芽。根據(jù)觀察:用1/2MS為基本培養(yǎng)基的處理芽團(tuán)表現(xiàn)葉色綠,子芽多且植株高大粗壯,長(zhǎng)勢(shì)好。用1/8MS為基本培養(yǎng)基的處理芽團(tuán)表現(xiàn)葉色顏色鮮紅,但子芽較少且植株偏矮小,長(zhǎng)勢(shì)較差。細(xì)胞分裂素中以添加2ip 0.03為很好,用6-BA和6-KT雖然子芽多,但會(huì)導(dǎo)致葉片皺縮不舒展且葉片明顯縮小,表現(xiàn)不正常。綜上分析,1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L處理培養(yǎng)基用于芽團(tuán)在增殖擴(kuò)繁很好,芽多苗大且無(wú)皺縮芽,但葉片雖大顏色卻偏綠,而客戶要求是苗大且葉片顏色鮮紅。嘗試在續(xù)代過(guò)程中用兩次1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培養(yǎng)基后再用一次1/8MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培養(yǎng)基,達(dá)到了很好的效果:苗高大舒展,葉片又呈現(xiàn)鮮艷的紅色,客戶非常滿意。
2.4 根的誘導(dǎo)
將芽團(tuán)中H>1.2 cm的粗壯單芽挑下,去除邊緣黑褐葉片接入四種生根試驗(yàn)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基的基本母液為1/8MS,每升分別添加IAA 0.01,IAA 0.03,NAA 0.01,NAA 0.03和活性碳200 mg。經(jīng)觀察,以每升添加IAA 0.03和活性碳200 mg的培養(yǎng)基為很佳。7~10天后根就開(kāi)始萌動(dòng),20天后有100%的苗都生出2~3條長(zhǎng)約0.5 cm的根,而且芽苗舒展,葉大色紅。
3 移植
將已生根的小苗放入蔭棚內(nèi)煉苗10~15天,使其適應(yīng)自然環(huán)境后將小苗從培養(yǎng)器皿中取出,洗去培養(yǎng)基移栽入1/3椰糠+2/3泥炭土的基質(zhì)中,注意保溫保濕,小苗很快正常生長(zhǎng),成活率85%以上。
4 結(jié)語(yǔ)
1)在捕蠅草的組織培養(yǎng)中誘導(dǎo)愈傷以MS+6-BA 0.1 mg/L為好。從愈傷中誘導(dǎo)出芽以1/2MS不添加任何細(xì)胞分裂素為很佳。
2)在捕蠅草的繼代培養(yǎng)中,為保證生產(chǎn)出高大舒展,葉片又呈現(xiàn)鮮艷紅色的苗。采用兩種不同基本母液的培養(yǎng)基交替使用,達(dá)到了很好的效果。
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