1、植物組織培養(yǎng)將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細(xì)洗干凈，如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾?。把材料切割成適當(dāng)大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細(xì)小的材料，可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗在污染嚴(yán)重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質(zhì)性的物質(zhì)，便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然，較理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)—吐溫。

  2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內(nèi)完成，準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強(qiáng)，也很易殺傷植物細(xì)胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內(nèi)部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發(fā)后再剝除外層，取用內(nèi)部材料。

  3、是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據(jù)情況選取1～2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次三分鐘左右，視采用的消毒液種類，涮洗3～10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細(xì)胞的副作用注意：

  ①酒精滲透性強(qiáng)，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細(xì)胞。

  ②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。

  ③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。

  ④漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠，所以對于幼嫩材料要慎用。

  ⑤在消毒液中加入濃度為0.08～0.12%的吐溫20或80(一種濕潤劑)，可以降低植物材料表面的張力，達(dá)到更好的消毒效果。

  以上就是植物組織培養(yǎng)的三個培養(yǎng)步驟。后續(xù)大家有什么想要了解咨詢的可以關(guān)注我們的官網(wǎng)，也可以隨時聯(lián)系我們。